عملیات تلقیح میکروبی

عملیات تلقیح میکروبی

1. تلقیح مایل (با استافیلوکوکوس اورئوس)
(1) قبل از عمل، دست های خود را با الکل 75 درصد پاک کنید و پس از تبخیر الکل لامپ الکل را روشن کنید.
(2) لوله کششی و صفحه شیبدار را بین شست دست چپ و چهار انگشت دیگر نگه دارید، به طوری که صفحه مایل و طرف دارای کشش به سمت بالا و در موقعیت افقی قرار گیرند.
(3) ابتدا کرنش و تامپون را روی صفحه شیبدار بچرخانید تا در حین تلقیح به راحتی بیرون کشیده شود.
(4) حلقه تلقیح را در دست چپ نگه دارید (مانند نگه داشتن قلم)، و انتهای حلقه را با شعله استریل کنید و سپس بقیه لوله آزمایش را که ممکن است به داخل لوله آزمایش کشیده شود، استریل کنید.
(5) از انگشت حلقه، انگشت کوچک و کف دست راست برای بیرون کشیدن لوله فشار و پلاگین پنبه ای یا درپوش لوله آزمایش لوله آزمایش شیب دار استفاده کنید تا به طور همزمان وصل شود و سپس دهان لوله آزمایش را بگذارید. به آرامی بیش از حد گرم شود تا استریل شود (آن را خیلی داغ نکنید).
(6) حلقه تلقیح سوخته را به داخل لوله کشت باکتری گسترش دهید، حلقه تلقیح را روی دیواره داخلی لوله آزمایش یا محیط بدون خزه باکتریایی لمس کنید، بگذارید خنک شود و سپس کمی خزه باکتریایی را به آرامی بتراشید و سپس خارج کنید. باکتری ها از باکتری هاحلقه تلقیح را از لوله بذر بیرون بکشید.
(7) به سرعت حلقه تلقیح آغشته به کرنش را به لوله آزمایش شیبدار دیگری که باید متصل شود، گسترش دهید.از پایین اریب به سمت بالا، یک خط متراکم به شکل Z به جلو و عقب ایجاد کنید.گاهی اوقات می توان از سوزن تلقیح برای کشیدن خطی در مرکز محیط برای تلقیح مایل استفاده کرد تا ویژگی های رشد سویه مشاهده شود..
(7) به سرعت حلقه تلقیح آغشته به کرنش را به لوله آزمایش شیبدار دیگری که باید متصل شود، گسترش دهید.از پایین اریب به سمت بالا، یک خط متراکم به شکل Z به جلو و عقب ایجاد کنید.گاهی اوقات می توان از سوزن تلقیح برای کشیدن خطی در مرکز محیط برای تلقیح مایل استفاده کرد تا ویژگی های رشد سویه مشاهده شود.
(8) پس از اتمام تلقیح، حلقه تلقیح را بیرون بیاورید تا دهانه لوله بسوزد و آن را با یک پلاگین پنبه ای ببندید.
(9) حلقه تلقیح را با سوزاندن آن به رنگ قرمز استریل کنید.حلقه تلقیح را پایین بیاورید و پلاگین پنبه ای را سفت کنید.
2. تلقیح مایع
(1) محیط مایل به محیط مایع متصل است.از این روش برای مشاهده ویژگی های رشد باکتری ها و تعیین واکنش های بیوشیمیایی استفاده می شود.روش عمل مانند قبل است، اما دهانه لوله آزمایش به سمت بالا متمایل شده است تا پس از وارد شدن باکتری، مایع کشت از بیرون خارج نشود.حلقه تلقیح و دیواره داخلی لوله را چند بار بمالید تا باکتری های حلقه زیرین شسته شوند.پس از تلقیح، پلاگین پنبه ای را ببندید و لوله آزمایش را به آرامی در کف دست بزنید تا باکتری ها کاملا پراکنده شوند.
(2) محیط مایع را از محیط مایع تلقیح کنید.هنگامی که سویه مایع است، علاوه بر حلقه تلقیح، از یک پیپت یا قطره چکان استریل برای مفصل استفاده کنید.هنگام تلقیح، فقط پلاگین پنبه ای را که در کنار شعله قرار دارد، بیرون آورده، نازل را از داخل شعله عبور دهید، مایع باکتریایی را با یک پیپت استریل داخل محلول کشت مکیده و خوب تکان دهید.
3. واکسیناسیون پلیت
باکتری ها رگه ای شدند و روی صفحات پخش شدند.
(1) تلقیح با رگه زدن به روش رگه جداسازی مراجعه کنید.
(2) پوشش و تلقیح پس از مکیدن محلول باکتری به داخل بشقاب با پیپت استریل، آن را با یک میله شیشه ای استریل شده به طور یکنواخت روی سطح صفحه پخش کنید.
4. تلقیح پنچری
سویه ها در محیط عمیق جامد تلقیح می شوند.این روش برای تلقیح باکتری های بی هوازی و یا برای مشاهده خواص فیزیولوژیکی در هنگام شناسایی باکتری ها استفاده می شود.
(1) روش عمل مانند بالا است، اما سوزن تلقیح مورد استفاده باید مستقیم باشد.
(2) سوزن تلقیح را از مرکز محیط کشت سوراخ کنید تا به انتهای لوله نزدیک شود، اما در آن نفوذ نکنید و سپس به آرامی از طریق روش اصلی سوراخ کردن آن را بیرون بکشید.

Microbial inoculation operation


زمان ارسال: آوریل-19-2022

پیام خود را برای ما ارسال کنید:

پیام خود را اینجا بنویسید و برای ما ارسال کنید